分子检测技术主要包括以下几种:
聚合酶链反应(PCR)
传统PCR:最原始、最简单的基于凝胶的低通量PCR方法,通过琼脂糖凝胶电泳或毛细管电泳等方法对PCR扩增产物进行定性检测分析。
实时荧光定量PCR(RT-qPCR):PCR技术的一种改进,通过检测荧光信号来量化目标DNA的数量,实现对基因表达水平的定量分析。
数字PCR(dPCR):一种基于微流控技术的PCR方法,能够将每个DNA分子独立扩增并进行计数,具有极高的灵敏度和准确性。
荧光原位杂交(FISH)
通过染色体特异性的DNA片段(探针)来检测染色体的易位、基因的重排以及肿瘤抑制基因的丢失等。
基因芯片技术
利用固定在芯片上的DNA探针与待测样本中的DNA或RNA进行杂交,然后对杂交结果进行扫描和检测,实现对多个基因片段的高效测序。
第二代高通量测序技术(NGS)
通过大规模并行测序,能够对基因组、转录组等进行全面的测序,广泛应用于疾病诊断、基因组研究和药物开发等领域。
DNA印迹技术(DNA Blotting)
利用分子印迹聚合物模拟酶-底物或抗体-抗原之间的相互作用,对印迹分子进行专一识别,常用于临床癌症诊断。
单核苷酸多态性(SNP)
通过检测基因组中的单核苷酸变异,用于遗传病的诊断和个体基因特征分析。
连接酶链反应(LCR)
利用DNA连接酶在相邻引物之间形成磷酸二酯键,用于检测特定DNA序列的变异。
印迹杂交技术(如FSH或CISH)
通过染色体特异性的DNA片段(探针)来检测染色体的易位、基因的重排以及肿瘤抑制基因的丢失等。
RNA成像技术
用于检测RNA分子在组织和细胞中的空间分布和表达丰度,如活细胞动态RNA成像技术、单分子RNA FISH原位杂交等。
蛋白质印迹技术(Western Blot)
用于检测蛋白分子的空间分布和表达丰度,通过电泳和转膜技术对蛋白质进行定性和定量分析。
这些技术各有其独特的优势和应用场景,选择合适的分子检测技术需要根据具体的检测需求、样本类型和实验条件来决定。