MSAP,全称为 甲基化敏感扩增多态性技术(methylation sensitive amplification polymorphism),是一种用于检测DNA甲基化的技术。该技术由Reyna-lópez等人报道,并基于扩增片段长度多态性(AFLP)技术建立。MSAP技术通过提取高质量基因组DNA,并使用EcoRI/HpaII和EcoRI/MspI两组酶组合进行双酶切。酶切后的DNA片段会连接上相应的限制性内切酶接头,并利用接头序列设计的预扩增引物进行PCR扩增。随后,稀释后的扩增产物会加入带有选择性碱基的引物进行第二次PCR扩增。最终,通过毛细管电泳对扩增产物进行统计和分析,以检测DNA条带的多态性。
MSAP技术主要用于检测双相型真菌的DNA甲基化,通过比较不同样本的DNA条带模式,可以分析出样本间的甲基化差异。这种技术具有高度灵敏性和准确性,可用于研究基因表达调控、基因组结构和功能等方面的问题。
此外,MSAP技术还可以应用于其他领域,如植物基因组学研究、医学诊断等。例如,有研究通过优化MSAP反应体系,成功检测到了桃树基因组中的DNA甲基化变化。
综上所述,MSAP是一种强大的DNA甲基化检测技术,具有广泛的应用前景。