石蜡切片染色程序通常包括以下步骤:
脱蜡
将石蜡切片放入二甲苯I中10分钟,然后放入二甲苯II中10分钟,以彻底溶解残存切片上的石蜡。
之后依次通过100%酒精、95%酒精I、95%酒精II、80%酒精、70%酒精各1-2分钟,最后用自来水冲洗片刻。
水化
无水酒精I、无水酒精II各1-2分钟,95%酒精1-2分钟,80%酒精1-2分钟,自来水洗片刻。
染色
苏木素染核:将切片浸入苏木素液中10-15分钟,然后自来水洗片刻。
盐酸酒精分化:1%盐酸酒精分化0.5-1分钟,自来水冲洗片刻。
碳酸锂饱和水溶液反蓝:1分钟,自来水冲洗15分钟至数小时。
伊红染色:0.5%伊红水溶液染色2-5分钟,自来水洗片刻。
脱水
依次放入95%酒精I、95%酒精II、无水酒精I、无水酒精II各1-2分钟,最后放入二甲苯I、二甲苯II各5-10分钟进行透明。
封片
在切片上滴加封片液,覆盖封片玻片,然后在显微镜下观察和分析。
注意事项:
在整个染色过程中,应严格按照染色操作说明书进行,确保每一步骤都充分执行。
染色前务必去除组织切片上的多余水分,避免染液被稀释。
染色过程中要避免在玻片上贴标签纸,以免脱蜡时胶黏到玻片上。
染色完成后,切片需要彻底冲洗和脱水,以确保染色效果最佳。
这些步骤适用于常规的苏木素-伊红(H&E)染色,如果需要进行特殊染色,如免疫组化,则还需添加相应的抗体和试剂,并进行相应的处理步骤。