脱水包埋程序是什么

时间:2025-01-17 13:18:29 程序应用

脱水包埋程序通常包括以下步骤:

固定

将组织放入固定液中(如4%多聚甲醛)固定一段时间(例如3-4小时),以杀死并保存组织形态。

脱水

乙醇脱水:依次使用不同浓度的乙醇(50%、70%、85%、95%及100%)进行脱水,每个浓度处理一定时间(例如90分钟或60分钟)。高浓度的乙醇有助于去除组织中的水分。

丙酮脱水:使用100%丙酮进行最终脱水,丙酮是一种有机溶剂,能较好地与水和包埋剂混溶。

透明

二甲苯透明:将脱水后的组织依次放入不同浓度的二甲苯中(例如1/2乙醇+1/2二甲苯、纯二甲苯、纯二甲苯),每个步骤处理一段时间(例如60分钟)。二甲苯作为过渡溶剂,有助于组织透明,便于后续的包埋过程。

渗透

石蜡渗透:将透明后的组织放入熔化的石蜡中,使石蜡渗透到组织内部。通常使用二甲苯和石蜡的混合物(例如1/2二甲苯+1/2石蜡)进行渗透,分多次进行,以确保石蜡完全填充组织内部。

包埋

包埋盒放置:将渗透好的组织连同包埋盒放入石蜡包埋机的模具中,摆好位置。

冷却:将模具放置在石蜡包埋机的冷台上进行冷却,使石蜡凝固并形成坚实的蜡块。

后续处理

切片:将包埋好的蜡块进行切片,制备成显微镜下观察的切片。

注意事项:

脱水过程中,组织块应充分搅拌以确保均匀脱水。

透明和渗透步骤中,时间和温度需严格控制,避免组织变脆或透明不充分。

包埋过程中,要确保蜡块内部无气泡,以免影响切片质量。

以上步骤和注意事项适用于常规的石蜡包埋过程,具体操作可能因实验要求和组织类型而有所不同。