链霉亲和素(Streptavidin,简称SA)是一种 来自链霉菌的四聚体蛋白质,广泛应用于生物化学和分子生物学实验中。SA与生物素的结合常被认为是自然界中最强的非共价相互作用之一,其解离常数(Kd)可低至10^-14~10^-15M,反应几乎不可逆。一分子SA可以高度特异性地结合四分子生物素,这一特性使其成为重要的生物学工具。
链霉亲和素的主要应用包括:
免疫检测信号放大:
通过将SA与辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶(AP)、荧光基团或磁珠偶联,可用于酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫组织化学(IHC)、蛋白质印迹(WB)等。
亲和色谱填料的制备:
SA可用于制备高效的亲和色谱填料,用于分离和纯化生物分子。
生物传感器和生物芯片的制作:
利用SA与生物素之间的高亲和力,可以制作高灵敏度的生物传感器和生物芯片。
蛋白质纯化:
Strep-tag®系统是基于SA与生物素的相互作用开发的蛋白质纯化系统,通过将Strep标签融合于重组蛋白上,可以实现该蛋白的亲和纯化。
磁珠偶联:
链霉亲和素磁珠(如GR 3μm磁珠)可以高效地结合游离生物素或生物素化后的各种抗体、核酸、蛋白等配体/靶标分子,应用于NGS(二代测序)、特异性捕获序列、纯化蛋白质/肽、高灵敏度免疫检测、病原体检测等实验。
链霉亲和素因其高亲和力、低非特异性结合和出色的特异性吸附性能,在分子生物学研究和诊断检测中发挥着不可替代的作用。